Agar Salmonella-Shigella nadácia, príprava a použitie



Agar Salmonella-Shigella tiež známy ako SS agar, je stredne selektívne a diferenciálne médium, špeciálne navrhnuté na izoláciu enteropatogénnych baktérií rodov Salmonella a Shigella z environmentálnych aj klinických vzoriek..

SS agar má komplexné zloženie; Pozostáva z mäsového extraktu, peptónu, laktózy, solí žlčových kyselín, citrátu sodného, ​​tiosíranu sodného, ​​citranu železitého, agaru, neutrálnej červenej, jasne zelenej a destilovanej vody. Vzhľadom na svoju veľkú selektivitu je možné pestovať vzorky s bohatou zmiešanou flórou.

V laboratóriách mikrobiológie sa médium Salmonella-Shigella široko používa na vyšetrenie prítomnosti Salmonella a Shigella vo vzorkách hnačkových výkalov, odpadových vôd, pitnej vody a potravín..

Niekedy je potrebné použiť pred obohatené bujóny (laktózový bujón) a obohatenie (selenitový cystínový bujón) na regeneráciu kmeňov Salmonella.

Tieto kroky sú potrebné vtedy, ak existuje podozrenie na existenciu salmonely vo veľmi malom množstve, alebo tam, kde sa kmeň môže zneužívať procesmi typickými pre priemyselnú výrobu, najmä spracované potraviny. Odporúča sa tiež obohatiť vzorky stolice od pacientov, ktorí boli liečení antibiotikami.

Následne môže byť obohatený bujón naočkovaný na agar Salmonella-Shigella a iné podobné médiá, ako je napríklad xylózový agar, deoxysiloxán lyzín (XLD) a enterický Hektoen agar (HE)..

index

  • 1 Nadácia
    • 1.1 Výživová sila
    • 1.2 Konzistentnosť
    • 1.3 Selektívne
    • 1.4 Rozdiel
  • 2 Príprava
  • 3 Použite
  • 4 Obmedzenia
  • 5 Kontrola kvality
  • 6 Referencie

nadácie

Každá zložka kultivačného média Salmonella-Shigella má špecifickú funkciu a zmes ako celok má vlastnosti, ktoré ho charakterizujú..

Výživná sila

Mäsový extrakt a peptón (strávený kazeín a živočíšne tkanivo) poskytujú potrebné živiny (dusíky, uhlík a vitamíny) na vývoj mikroorganizmov, ktoré sú schopné tolerovať zvyšok zložiek..

konzistencia

Agar-agar je zodpovedný za poskytnutie pevnej konzistencie médiu.

selektívne

Toto médium je vysoko selektívne, pretože obsahuje žlčové soli, citrát sodný a jasne zelenú. Preto inhibuje rast všetkých grampozitívnych baktérií a väčšiny gramnegatívnych bacilov vrátane niektorých koliformných baktérií..

Zatiaľ čo baktérie rodu Salmonella a niektoré kmene Shigella podporujú tieto zlúčeniny.

Najmä rod Salmonella je veľmi odolný voči žlčovým soliam, natoľko, že sú schopní žiť v žlčníku niektorých pacientov s dopravcami, ktorí neustále vylučujú baktérie výkalmi..

diferenciál

Laktóza je fermentovateľný sacharid, ktorý pomáha rozlíšiť kmene fermentujúce laktózu od nefermentujúcich kmeňov. Túto vlastnosť dokazuje prítomnosť pH indikátora, ktorý v tomto médiu je fenolová červeň.

Kmene fermentujúce laktózu dávajú červené kolónie, zatiaľ čo nefermentujúce kmene sú bezfarebné. Táto charakteristika je dôležitá, pretože Salmonella a Shigella nefermentujú laktózu.

Na druhej strane toto médium obsahuje tiosíran sodný ako zdroj síry a citran železitý ako zdroj železa. Obe zlúčeniny sú schopné rozlíšiť baktérie schopné produkovať sírovodík. Tieto reagujú za vzniku čiernej zrazeniny nerozpustného a viditeľného sulfidu železitého.

Táto vlastnosť má niektoré kmene rodu Salmonella. Normálne sú ich kolónie bezfarebné ploché s čiernou bodkou v strede. Zvyšok salmonel nevytvára H2S a vyvíjať sa ako bezfarebné kolónie.

Na druhej strane kolónie rodu Shigella sú bezfarebné, bez sčernenia.

príprava

Je to veľmi jednoduché na prípravu.

Navážte 63 g dehydratovaného komerčného média a rozpustite v jednom litri destilovanej vody. Roztok sa zahrieva a mieša. Zmes môže dosiahnuť teplotu varu až do minút.

Toto médium by sa nemalo autoklávovať. Po jeho rozpustení sa podáva priamo na jednej alebo dvoch sterilných platniach.

Pri stuhnutí sú usporiadané invertovane v zariadení na tvorbu plakov a uchovávané v chladničke (2 - 8 ° C) až do použitia..

Médium po príprave by malo mať pH 7,2 ± 0,2 a oranžovú červenú.

Je dôležité, aby sa dosky pred vysiatím vzoriek temperovali. Originálnu vzorku môžete priamo nasať, vypustiť materiál na časti agaru a odtiaľ odtiahnuť striekaním.

V prípade použitia obohatených bujónov sa nechá prejsť časť selenitového bujónu a zaseje sa drigalskou špachtľou..

Inkubuje sa 24 hodín pri 37 ° C v aerobióze.

Majte na pamäti, že množstvo gramov na váženie a konečné pH média sa môže líšiť v závislosti od komerčného domu. Základná doska média vždy signalizuje jej prípravu.

použitie

Často sa používa pri analýze kultúr stolice av mikrobiologickej štúdii reziduálnych vzoriek vody, pitnej vody a potravín.

Často sa pripravia dvojité dosky, na jednej strane sa umiestni agar Salmonella-Shigella a na druhej strane XLD agar.

obmedzenia

-Niektoré kmene Shigella v tomto médiu nerastú. Preto sa neodporúča na primárnu izoláciu tohto rodu.

-Nie každá jasná kolónia s čiernym centrom je indikátorom salmonely; musia sa vykonať biochemické testy, aby sa dosiahla správna identifikácia, pretože kolónie niektorých kmeňov Proteus sú nerozoznateľné od kolónií Salmonella..

-Dehydratované médium by malo byť opatrné, aby bolo vystavené prostrediu, pretože je veľmi hygroskopické. Preto sa musí skladovať v suchom a dobre uzavretom prostredí. Otvorené na veľmi krátke obdobia.

-V priebehu času sa môžu žlčové soli v médiu vyzrážať, čím sa vytvorí obraz podobný matnému v agare, ale to neovplyvňuje výsledky..

-Niektoré kmene Shigella môžu pomaly fermentovať laktózu.

Kontrola kvality

Aby sa dokázalo, že médium funguje správne, odporúča sa zasadiť známe alebo certifikované kontrolné kmene a pozorovať, či rast spĺňa očakávané charakteristiky.

Na tento účel sa používajú kmene E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium alebo Enterococcus faecalis.

Očakávané výsledky sú:

Escherichia coli --ružové konvexné kolónie.

Enterobacter a Klebsiella- veľké kolónie a červené alebo ružové mukoidy.

Shigella flexneri --číre alebo bezfarebné ploché kolónie.

Salmonella typhimurium - bezfarebné kolónie s čiernym stredom.

Enterococcus faecalis-- celková inhibícia.

referencie

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Agar Salmonella-Shigella. 2009. K dispozícii na adrese: f-soria.es
  2. Laboratórium BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. K dispozícii na adrese: bd.com
  3. Laboratories Britania. Salmonella-Shigella Agar. 2015. K dispozícii na adrese: britanialab.com
  4. Diagnostika Valtek. Agar Salmonella-Shigella (agar SS) .2010. Dostupné na: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologická diagnostika Bailey & Scott. 12 ed. Redakcia Panamericana S.A. Argentína.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vydanie. Redakcia Panamericana S.A. Argentína.