Zdieľam:
Chromatogram pre to, čo to je a typy
chromatogram je dvojrozmerný grafický záznam získaný v absorpčnom médiu, ktorý ukazuje separáciu látok chromatografiou. Na chromatograme sa vytvorí viditeľný vzor, vrcholy alebo škvrny, ktoré odrážajú fyzikálne oddelenie zložiek zmesi.
Nižší obrázok je chromatogram s tromi píkmi, A, B a C, troch zložiek vzorky oddelenej chromatografiou. Pozoruje sa, že každý z týchto troch vrcholov má inú výšku a polohu v časovej osi chromatogramu.
Os os y alebo Y zaznamenáva informácie o sile signálu (v tomto prípade v milivoltoch mV). Predstavuje register, v závislosti od detektora, určitej fyzickej vlastnosti látky alebo samostatnej zložky zmesi.
Výška píku je úmerná koncentrácii oddelenej zložky vzorky v optimálnom systéme. Tak je napríklad ľahké predstaviť si, že zložka B je väčšia ako A a C.
Na osi x alebo X je znázornený retenčný čas zložiek vzorky alebo zmesi. Je to čas, ktorý uplynie od vstreknutia vzorky až do jej zastavenia, pričom je odlišný pre každú čistú látku.
index
- 1 Čo je to chromatogram??
- 1.1 Identifikácia látok
- 1.2 Klasifikácia čistoty látok
- 1.3 Kvantifikácia látok
- 2 Typy
- 2.1 Chromatogramy na papieri alebo tenkej vrstve
- 2.2 Chromatogramy generované detektormi
- 3 Odkazy
Čo je to chromatogram??
Predstavuje konečný záznam celého chromatografického procesu. Z neho sa získajú analytické parametre. To možno získať ako elektronický súbor, vytlačený histogram alebo podporu procesu; napríklad na papieri.
Os Y je generovaná detektormi signálu alebo intenzitou odozvy, ako sú spektrofotometre. Optimálna analýza času, charakteristík získaných vrcholov alebo škvŕn je nevyhnutná; veľkosť, umiestnenie, farba, okrem iných aspektov.
Analýzy chromatogramov všeobecne vyžadujú použitie kontrol alebo štandardov, látok identity a známej koncentrácie. Analýza týchto kontrol umožňuje stanoviť porovnaním so vzorkami charakteristickými pre zložky skúmanej vzorky.
Na chromatograme môžete pozorovať a analyzovať, ako bola separácia zložiek zmesi vykonaná. Jeho optimálna štúdia umožňuje identifikovať látku, preukázať jej čistotu, kvantifikovať množstvo látok prítomných v zmesi, okrem iných aspektov..
Získané informácie môžu mať kvalitatívny charakter; napríklad keď sa identifikujú látky a stanoví sa ich čistota. Kvantitatívne informácie sa týkajú stanovenia počtu zložiek zmesi a koncentrácie separovaného analytu.
Identifikácia látok
Analýzou výsledkov chromatogramu možno identifikovať rôzne látky porovnaním retenčných časov so známymi látkami. Môže sa pozorovať, ak sledované látky prechádzajú rovnakou vzdialenosťou, ak majú rovnaký čas ako známe látky.
Napríklad, chromatogram umožňuje detekciu a identifikáciu v moči športovcov liečivými metabolitmi, ako sú stimulanty a steroidy. Je dôležitou podporou pri štúdiu a skúmaní niektorých metabolitov produkovaných genetickými poruchami u novorodencov.
Chromatogram okrem iného umožňuje detekciu halogénovaných uhľovodíkov prítomných v pitnej vode. Je nevyhnutná v laboratórnej analýze kontroly kvality, pretože umožňuje detekciu a identifikáciu kontaminantov prítomných v rôznych produktoch.
Klasifikácia čistoty látok
Na chromatograme môžete rozlišovať medzi čistými a nečistými látkami. Čistá látka by produkovala jediný pík v chromatograme; zatiaľ čo nečistá látka by produkovala dva alebo viac vrcholov.
Vhodnou úpravou podmienok, za ktorých sa uskutočňuje chromatografia, sa môže zabrániť tomu, aby dve látky tvorili jediný pík.
Kvantifikácia látok
Analýzou plochy píkov chromatogramu sa môže vypočítať koncentrácia zložiek vzorky.
Preto je plocha píku úmerná množstvu látky prítomnej vo vzorke. Tieto kvantitatívne údaje sa získajú vo vysoko citlivých systémoch, ako sú napríklad systémy, ktoré generujú napríklad plynové alebo kvapalinové chromatografie.
typ
Jedna z klasifikácií chromatogramov úzko súvisí s rôznymi typmi chromatografie, ktoré vytvárajú zodpovedajúci chromatogram.
V závislosti od podmienok vykonania detektorov, okrem iného, sa chromatogram bude líšiť svojím obsahom a kvalitou.
Chromatogramy na papieri alebo tenkej vrstve
Chromatogram sa môže generovať priamo na papieri alebo tenkom filme, čo priamo ukazuje distribúciu alebo distribúciu zložiek vzorky.
Je veľmi užitočná na separáciu a štúdium farebných látok, ktoré majú prírodné pigmenty, ako je chlorofyl. Môže byť podrobený vývojovým procesom v prípade, že látky nemajú prirodzenú farbu a sú užitočné pre kvalitatívne štúdie.
Chromatogramy generované detektormi
Chromatogram sa dá získať aj pomocou detektora, ktorý zaznamenáva odozvu, výstup alebo konečný signál chromatografie. Ako už bolo spomenuté, tento detektor je zvyčajne spektrofotometer, hmotnostný spektrometer, automatické sekvencery, elektrochemiká, okrem iného..
Chromatogramy generované v stĺpcoch, či už z plynov, alebo kvapalín, ako aj z tých, ktoré majú vysoké rozlíšenie v tenkej vrstve, používajú detektory.
V závislosti od typu detektora môže byť chromatogram klasifikovaný ako diferenciálny alebo integrálny, v závislosti od formy odozvy detektora.
Diferenciálny chromatogram
Diferenciálny detektor kontinuálne meria signál odozvy chromatogramu, zatiaľ čo integrálne detektory kumulatívne merajú zodpovedajúci signál.
Diferenciálny chromatogram je chromatogram získaný diferenciálnym detektorom. Medzi týmito detektormi možno uviesť napríklad spektrofotometre a detektory zmien elektrickej vodivosti.
Tento typ chromatogramu ukázal výsledok separácie aniónov zo vzorky, detegovanej nepriamou fotometriou. Tiež sa dosiahli rovnaké výsledky pre štúdium iónov, napríklad s konečnou detekciou konduktometricky.
V hornom grafe je znázornený príklad diferenciálneho chromatogramu získaného automatickými DNA sekvenátormi (deoxyribonukleová kyselina). Graf jasne ukazuje vrcholy štyroch farieb, jednu farbu pre každú z dusíkatých báz DNA.
Vďaka podpore počítačového programu je uľahčená interpretácia sledu analyzovaných báz DNA, ako aj komplexnejších analytov..
Komplexný chromatogram
Integrálny chromatogram zodpovedá tomu, ktorý bol získaný integrálnym detektorom. Na tomto chromatograme je preukázaný výstup jednej študovanej zložky. Žiadne píky neboli získané ako v diferenciáli.
V integrálnom chromatograme sa získa záznam s tvarom opísaným ako krok. Táto forma je časťou chromatogramu, ktorá zodpovedá množstvu jednej látky, ktorá opúšťa kolónu.
referencie
- Bhanot, D. (2013). Ako čítať do Chromatogram? Zdroj: lab-training.com
- Carey, F. A. (2006). Šiesta edícia organickej chémie. Mc Graw Hill
- Chromatografia dnes. (2014). Čo je to Chromatogram? Zdroj:: chrome.org
- Mathias, J. (2018). Príručka pre začiatočníkov: Ako interpretovať plynovú chromatografiu chromatografia Hmotnostná spektrometria Výsledky. Zdroj: innovatechlabs.com
- Španielska spoločnosť pre chromatografiu a súvisiace techniky. (2014). Chromatogram. Získané z: secyta.es
- Wikipedia. (2019). Papierová chromatografia. Zdroj: wikipedia.org